Eletroforese, também chamado de cataforese, é um processo electrokinetic descoberto pela primeira vez em 1807 pelo cientista alemão Ferdinand Friedrich Reuss depois de trabalhar com a influência de corrente contínua em soluções de água. A técnica, utilizados para separar as moléculas carregadas numa matriz uniforme, tem sido utilizado por biólogos moleculares e outros investigadores desde então. Os métodos clássicos de electroforese em gel e electroforese em capilar - ambos os quais utilizam UV e / ou marcação fluorescente para análise, estão agora unidos por dieletroforese - um método mais recente que não requer rotulagem.
Colóides, Matrix e Separação
Um colóide é um outro nome para uma mistura cujas partículas são demasiado pequenas para serem vistas a olho nu, mas demasiado grande para ser moléculas. Em termos electroforéticos, o colóide é referido como a matriz - a solução que também contém as partículas serem separadas. No caso de electroforese em gel, a matriz é constituída por uma mistura de gel de agarose e as moléculas a ser separada.
eletroforese em gel
Esta técnica electroforética clássica utiliza um gel de agarose a migrar partículas carregadas de ADN de diferentes tamanhos. Como o DNA é carregada negativamente, ela se move através da matriz de gel, quando uma corrente eléctrica é aplicada. partículas de ADN maior mover mais devagar do que as partículas mais pequenas, de modo que o produto final é uma linha distinta de bandas visíveis na agarose que criam uma impressão digital para as partículas a ser testado. Os marcadores fluorescentes são tipicamente usados para marcar as partículas. Este visuais representa muitas vezes Teste de DNA resulta em programas de televisão populares.
Electroforese Capilar (CE)
Esta técnica de separação utiliza um capilar para migrar partículas carregadas com rácios de raio únicas contra um campo elétrico aplicado. Quão rápido ou lento a partícula se move com esta técnica depende de sua velocidade iônica, e os resultados refletem isso tanto quanto resultados de eletroforese em gel de ilustrar tamanho de partícula. A matriz CE também consiste em um electrólito - muitas vezes, uma solução tampão aquosa - e UV ou marcadores fluorescentes são utilizados. A técnica relacionada, eletroforese capilar de zona (CZE), é estritamente limitado a separação de compostos iônicos.
Dieletroforese (DEP)
Considerando eletroforese em gel e CE usar corrente elétrica para mover partículas carregadas, dieletroforese (DEP) utiliza frequências de rádio para separar células com diferentes polarizabilidades. As células respondem de acordo com suas partículas characteristics- únicas de constituição genética similar e / ou respondem forma geométrica distintamente o suficiente para os investigadores a distingui-los. As células se movem através de um gradiente de campo elétrico quando uma força é aplicada dieletroforética. Esta técnica é inovador porque não exige as partículas a ser marcado e células podem ser utilizadas para estudos posteriores, a seguir ao isolamento e recuperação.