Um gel de agarose e não utilizada pode ser armazenado para uso posterior. No entanto, você precisa verificar isso durante o armazenamento a curto prazo para garantir que não é a desidratação. Ao invés de lidar com os problemas de um gel desidratado - matriz afetada e concentração de sal mais forte - é mais simples para fazer apenas um novo gel. Se você já tiver executado as manchas ou corantes gel e usados, você não pode armazenar o gel. Você deve visualizá-lo imediatamente como os corantes quebrar jusante uma vez visualizado, você descartar o gel de acordo com o protocolo.
Coisas que você precisa
- Erlenmeyer
- Saran wrap
- Parafilm
- Eletroforese de câmara, bem pentes e bandejas de fundição
Armazenado como da Solução
Misture a agarose com uma quantidade especificada de buffer, o calor para liquefazer - rodando muitas vezes - e, em seguida, deixe esfriar para solidificar.
Selar o frasco cuidadosamente com parafilme, uma vez que a agarose está totalmente fria.
Armazenar à temperatura ambiente durante duas a três semanas ou indefinidamente a 4 graus Celsius. Esta é uma solução de estoque de gel de agarose pré-misturado - exigirá reaquecimento antes da utilização.
Armazenado como um gel único em tampão
Despeje a quente liquefeito agarose para a câmara de eletroforese com os pentes bem no lugar e deixe arrefecer e solidificar.
Encher a câmara com tampão, cobrindo o gel de agarose agora-sólido, e remover o pente (s).
Selar a caixa de gel inteira e gel completamente - com Saran Wrap ou parafilme - e depois refrigerar e armazenar a 4 graus Celsius. O gel pode ser armazenada indefinidamente, desde que permanece coberta em tampão e é completamente selado. Caso o tampão evapore você vai acabar com uma maior concentração de sal do que o desejado, então o buffer deve ser alterado antes da electroforese.
Armazenado como um gel única sem buffer
Remover o tabuleiro de fundição com o gel de agarose solidificado da câmara de electroforese em gel após a molhagem com tampão.
Enrole o gel sólido molhado completamente - com ou sem o tabuleiro de casting - em Saran Wrap.
Refrigerar durante uma a duas semanas a 4 graus Celsius.
dicas & avisos
- Não deixe géis embrulhadas individuais no frigorífico indefinidamente - mesmo envolvido, eles vão começar a desidratar. Sua preocupação com o armazenamento de géis é a desidratação. Descarte se eles começam a olhar seco nas bordas ou mais fino do que quando você derramou-los.
- A única de agarose que pode ser armazenado utilmente após electroforese é o ácido nucleico separada excisado como uma banda a partir do gel e armazenada a 4 graus Celsius em um tubo Eppendorf selado-parafilme.
- Tenha muito cuidado se você remover o gel da fundição tray- o gel é muito frágil e vai rasgar facilmente.
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