Executando um teste de HPLC (cromatografia líquida de alta performance) é uma habilidade técnica, que só deve ser realizada por pessoal treinado. HPLC tem sido cada vez mais utilizados em laboratórios desde a década de 1980. Ele é usado para pesquisa e em laboratórios e universidades para separar e identificar moléculas ou compostos orgânicos complexos. O sistema pode ser executado em fase normal ou invertida.
A máquina HPLC consiste de um reservatório, desgaseificador, injector, coluna ligada ao forno e detector, integrador e software (consulte Recursos 1).
Coisas que você precisa
- Programas
- Computador
- HPLC
- balde de resíduos
- Reagente (metanol / água)
- pH (papel decisivo)
- Eletricidade
correndo HPLC
Ligue o aparelho HPLC seguindo as orientações do fabricante. Configurar a instrumentação (ver referência 1). Definir a HPLC correctamente é o aspecto principal deste ensaio e não é uma técnica padrão. Escolha o método correto para as substâncias que devem ser analisadas em HPLC.
Coloque a coluna da direita da maneira correta após a colocação seta mostrando. Definir o comprimento de onda a ser capaz de detectar os compostos complexos. Configure a temperatura adequada.
Lavar a coluna com metanol a 50% e água, durante 30 minutos. Permitir que a fase móvel, para passar através.
Configure a taxa de fluxo como indicado na metodologia.
A fase móvel de HPLC é crítica e resultados satisfatórios dependerá do facto de a preparação foi efectuada correctamente (ver referência 2). Existem dois tipos de fase móvel utilizada em HPLC, eluição de gradiente ou isocrãtica. O gradiente de eluição é o local onde são necessárias duas fases móveis orgânicos, em momentos diferentes. Com eluição isocrática, uma única fase orgânica é necessário (metanol / água).
Certifique-se de que a máquina HPLC eo computador estão ligados através de um cabo RS232 para permitir que as informações fluam entre as duas máquinas (ver referência 3).
Preparar a amostra de acordo com a especificação na metodologia. Escolha o método analítico específico desejado e registrado no computador.
Escolha o HPLC certo quando há muitas máquinas de HPLC ligados. Ir para instrumento e abrir a lista de amostras.
Abra uma janela e escrever o nome ea data do teste. Salve isso.
A lista de exemplos aparece em forma de gráfico. Complete os detalhes sobre o gráfico para a amostra que você preparou.
Colocar os frascos de amostra correctamente na máquina de acordo com a metodologia. Prima start para iniciar a análise.
dicas & avisos
- Todas as etapas HPLC ea preparação das amostras deve ser correta, a fim de evitar uma repetição do teste. investigações repetição custar tempo e dinheiro.
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