Os testes de bactérias gram-negativas

Neste teste, as bactérias são cultivadas em caldo contendo o indicador de pH vermelho de fenol, em conjunto com um tubo de menor inserido de cabeça para baixo no tubo de ensaio. Geralmente são utilizados quatro tubos - um com caldo de glicose, outro com lactose, sacarose com um terceiro e um quarto com manitol. Quando as bactérias fermenta os açúcares, que produz subprodutos ácidos que diminuem o pH da solução, fazendo com que o indicador de vermelho de fenol a amarelecer. Algumas bactérias também pode criar produtos alcalinos, embora o teste de fermentação de hidratos de carbono não é concebido para detectar estes. As bactérias podem ser categorizadas com base nos tipos de açúcares que fermentam e se eles produzem ácido e gás ou ácido sozinho.

O teste SIM incorpora três testes separados em um único procedimento, conveniente. As bactérias são introduzidos no ágar por esfaqueá-lo com uma ansa de inoculação. O ágar contém uma mistura de aminoácidos e dois indicadores, nitrato de chumbo e reagente de Kovac. Se as bactérias metabolizar os aminoácidos contendo enxofre, sulfureto de hidrogénio e formas combina com o nitrato de chumbo, transformando o negro de agar. Se as bactérias metabolizar o aminoácido triptofano, eles formam indole que reage com o reagente de Kovac, fazendo um anel vermelho brilhante. Finalmente, se as bactérias são capazes de se mover, que se espalhar para fora a partir do ponto em que eles foram inicialmente introduzido. Se eles não podem se mover, seu crescimento continua concentrada em torno do lugar onde o agar foi originalmente esfaqueado.

O teste utiliza citrato de cor verde ágar de citrato, que contém ácido cítrico e um indicador de pH. Se as bactérias têm a enzima permease citrato, eles metabolizam o citrato e produzir produtos alcalinos que fazem com que o indicador de pH que mudam de cor para azul. O teste da urease, pelo contrário, utiliza um caldo de ureia laranja com um indicador de vermelho de fenol em níveis baixos. Algumas bactérias têm uma enzima chamada urease e pode quebrar a ureia em dióxido de carbono e amônia. O amoníaco é alcalina e altera o pH. Se o caldo transforma vermelho-púrpura, as bactérias são urease-positiva.

Este teste utiliza agar contendo o aminoácido fenilalanina. Se as bactérias introduzidas para o agar possuem a enzima desaminase fenilalanina, eles quebram o aminoácido em ácido fenilpirúvico por remoção do grupo amino. As bactérias são deixadas a crescer durante um tempo, e depois é adicionado cloreto férrico. A cor ou permanecerá inalterada, caso em que as bactérias não têm a enzima, ou que vai ficar verde azeitona, caso em que as bactérias têm a enzima.

Estes testes podem ser utilizados para identificar bactérias Gram-negativas pertencentes a um género comummente encontrado. Salmonella, por exemplo, a lactose é negativo, a urease negativo, PA desaminase negativo e ácido-apenas (sem gás) positiva para a glicose, e pode mover-se (é móvel). De E. coli, por contraste, a lactose é positivo, negativo glucose, citrato negativa, hidrogénio-sulfureto negativo, indole-positivo e capaz de se mover. Ao realizar estes testes, microbiologistas pode descobrir qual o tipo de bactéria estavam presentes em uma amostra, que é especialmente importante para rastrear surtos de doenças.