Como faço para isolamento de bactéria no solo?

Isolando as bactérias do solo é um primeiro passo importante em muitos experimentos de microbiologia. Uma vez que eles são isolados, as bactérias podem ser ainda analisados para determinar as coisas, tais como a sua espécie e a sua função no ambiente do solo. Mesmo uma pequena quantidade de solo pode conter milhões de bactérias, o que faz com que seja necessário diluir uma amostra de solo, antes do isolamento de bactérias a partir da amostra.

Coisas que você precisa

Água destilada
Cilindro graduado
garrafa estéril com tampa
amostra de solo
4 tubos de ensaio tapados estéreis

15 esterilizadas de 1 ml. pipetas
ágar nutriente preparada a cerca de 45 graus C
10 placas de Petri estéreis
Marcador permanente

Medir 100 ml. água destilada no cilindro graduado e adicionar à garrafa estéril.
Pesar 1 g de amostra de solo e adicioná-lo à garrafa de água destilada. Tapar bem o frasco e agite-o para misturar a solução.
Rotular os tubos de ensaio estéreis "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5," e "10 ^ -6." Adicionar 9 ml de água destilada a cada um dos tubos, usando uma das pipetas.
Transferir 1 ml da solução na garrafa para o tubo rotulado "10 ^ -3," utilizando uma pipeta nova. Tape o tubo e agite-o suavemente até que a solução é bem misturada.
Transferir 1 ml do solução do "10 ^ -3" tubo de ensaio para o "10 ^ -4" tubo com uma pipeta nova. Tapar o "10 ^ -4" tubo e agite para misturar. Repetir este método para transferir solução do "10 ^ -4" tubo para o "10 ^ -5" tubo e, em seguida, a partir do "10 ^ -5" tubo para o "10 ^ -6" tubo.
Placa de três amostras de cada uma a partir da "10 ^ -4," "10 ^ -5" e "10 ^ -6" tubos. Usar uma nova pipeta para transferir 1 ml da solução a partir do tubo numa placa de Petri. Adicionar cerca de 15 ml de agar nutriente para a placa- em seguida, colocar a tampa sobre a placa e homogeneizar suavemente de modo a que o agar cobre a parte inferior da placa.
Adicione uma placa de controlo, colocando 1 ml de água destilada numa placa de Petri, utilizando uma pipeta nova. Adicionar ágar colocar a tampa e agite a placa.
Deixar as placas de Petri na posição vertical até que o ágar definiu. Em seguida, inverter as placas e incubar-los --- quer em uma incubadora ou em temperatura ambiente --- para tão pouco como 24 horas e até cinco dias.
Retirar as placas do incubador depois da quantidade desejada de tempo de incubação. Contar as colónias bacterianas em placas contendo cerca de 30 a 300 colónias. Use um marcador permanente para marcar as colônias já contados, a fim de evitar a contagem das mesmas colônias duas vezes.
Dividir o número de colónias contadas por diluição ---"10 ^ -4," "10 ^ -5" ou "10 ^ -6"--- Da solução do solo para cada prato. Encontrar o número de bactérias cultiváveis do grama do solo original da calculando a média dos resultados a partir de cada uma das placas contáveis.

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