Os produtos químicos utilizados nas análises de adn

Três tipos de ADN são purificadas para trabalhos científicos: ADN a partir do genoma (ADN genómico), todo o DNA a partir da célula (ADN total) ou a partir de plasmídeos, que podem auto-se multiplicam. purificação total de ADN celular utiliza produtos químicos que permitem a destruição de muitas membranas da célula durante a lise celular. O ethylenediaminetetraacetate química (EDTA) é frequentemente usado para tirar íons de magnésio, que são necessários para manter a rigidez das paredes das células, fazendo com que estes a enfraquecer a tal ponto que elas entram em colapso ou ruptura, liberando conteúdos e DNA da célula para análise. Além disso, o EDTA protege e preserva a integridade do DNA através da inibição de enzimas que estão normalmente presentes na célula, que pode fragmentar o ADN e inutilizá-lo.

A reacção em cadeia da polimerase (PCR) é um método de análise sofisticada utilizados para amplificar vários milhares de cópias de uma molécula de ADN, no entanto, que é cheio de problemas técnicos e imprecisões. Muitos cientistas, portanto, rotineiramente vários conjuntos diferentes de PCR para encontrar a condição mais óptima e os parâmetros para um determinado gene de interesse. Um produto químico utilizado para realizar uma optimização tal é o magnésio, o que estabiliza a enzima ADN polimerase utilizada na PCR e actua como um co-factor essencial para a actividade da enzima. Para PCR, o magnésio é utilizado sob a forma de um tampão de cloreto de magnésio.

O brometo de etídio é um corante que se liga a ADN por escorregamento entre os nucleótidos que formam um ADN de dupla hélice num processo conhecido como intercalação. Este corante pode então ser iluminado com uma lâmpada de luz ultravioleta, de modo que o ADN a que o brometo de etídio foi ligado pode ser visualizado. No entanto, é necessário pelo menos 1 nanograma de ADN para o brometo de etídio para ser vista adequadamente, portanto, é uma forma de detecção de ADN amplificado por PCR. Embora barato e amplamente utilizado, ele também é um produto químico mutagênico conhecido por causar câncer, por isso seu uso em laboratórios é altamente regulado e muitos cientistas estão se movendo para usar alternativas menos tóxicas.