Quais são tampões biológicos?

Os cientistas usar tampões biológicos para o estudo de processos biológicos em laboratório.

Em células e organismos vivos, os fluidos circundantes e no interior das células é mantida a um pH constante. O pH dentro deste sistema é muitas vezes crucial para as reacções bioquímicas que ocorrem no interior do organismo. Para o estudo de processos biológicos em laboratório, os cientistas utilizar tampões para manter o pH correcto durante a experiência. Muitos tampões biológicos foram originalmente descrita por Good e seus colegas em 1966 e ainda são usados ​​em laboratórios de hoje.

Como buffers de Trabalho

  • Um tampão é simplesmente uma solução contendo um ácido fraco e a sua base conjugada. Quando um ácido é adicionado ao tampão, que reage com a base conjugada fazendo um ácido fraco e quase que afecta o pH da solução.

Requisitos de um buffer

  • Um número de características fazem um tampão biológico eficaz. Eles devem ser solúveis em água, mas não é solúvel, ou minimamente solúvel em solventes orgânicos. O tampão não deve ser capaz de passar através da membrana da célula, tal como isto poderia afectar o comportamento das células. Os tampões devem ser não-tóxico, não deve absorver a radiação UV e deve permanecer inerte e estável durante todo o processo experimental. Temperatura e composição iônica não deve alterar o pH ou capacidade tampão.

A seleção de um buffer appopriate



  • O tampão escolhido deve ter um pKa na gama óptima para o processo em estudo. Um tampão com um pKa mais elevado é apropriado se não é provável que seja um aumento do pH durante a experiência, e vice-versa se o pH deverá cair. concentrações de tampão deve ser optimizada, como concentrações superiores a 25 mM pode ter melhor capacidade de tamponamento, mas pode inibir atividades celulares, tais como enzimas. O método também determina que tampão para usar- por exemplo, na electroforese, um tampão com uma força iónica baixa é adequado para impedir a matriz de gel de aquecimento.

Como para alterar o pH de um tampão

  • Uma vez que o pH pode alterar com mudanças de temperatura, os cientistas devem testar o pH dos tampões à temperatura a que se vai realizar o ensaio. Tris é um tampão especialmente susceptíveis a alterações do pH com a temperatura. Todos os medidores de pH deve ser calibrado à temperatura de trabalho. Os aditivos também podem alterar o pH, tornando necessário testar novamente. Para alterar o pH de um ácido, normalmente ácido clorídrico, ou base, usualmente hidróxido de sódio ou de potássio, é acrescentado isto deve ser feito lentamente para evitar a inactivação ou alterações químicas no tampão.

Exemplos de Tampões Biológicos

  • tampão TE, que é 10 mM Tris &HCl middot- e EDTA 1 mM, é adequada para uma série de valores de pH para o armazenamento de ácidos nucleicos. A electroforese é um método comum para o estudo de proteínas ou nucleico acids- este processo utiliza uma série de tampões, incluindo Tris-acetato-EDTA, Tris-glicina e tampões Tris-borato-EDTA. Estes tampões evitar o aquecimento da matriz de gel e pode conter aditivos tais como ureia e SDS, dependendo da investigação.

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